Resumo: Os microrganismos de solo apresentam uma grande diversidade, envolvendo grupos taxonomicamente distintos que desempenham papel na decomposição da matéria orgânica, ciclagem de nutrientes, agregação dos solos, dentre outros. Nesta diversidade, os fungos do gênero Trichoderma tem apresentado sucesso como agentes de biocontrole de fitopatógenos, como promotores de crescimento de plantas e, ainda, como indutores de resistência de plantas a doenças. Além disso, são importantes na sustentabilidade dos ecossistemas naturais. Com o objetivo de verificar a densidade populacional de fungos do gênero Trichoderma em ambientes naturais e agroecossistemas, em área de Cerrado, amostras de solos e raízes oriundas de vegetação nativa e de sistema de produção agroecológica foram coletadas na região do Distrito Federal, Brasil. Os pontos de coleta foram selecionados aleatoriamente, e cada amostra de solo ou raiz foi acondicionada individualmente. O solo aderido às raízes foi removido para as avaliações. Foram realizadas diluições seriadas das amostras e contagem do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFCs) de isolados de Trichoderma. Os resultados mostraram que o número de UFC variou dependendo da planta e da localidade avaliada. A substituição da vegetação nativa por sistemas de cultivo orgânicos não resultou em importante redução neste número.

Abstract: Soil microorganisms present a great diversity, involving taxonomically distinct groups that play a role in the decomposition of organic matter, nutrient cycling, soil aggregation, among others. In this diversity, the fungi of the genus Trichoderma have been successful plant pathogen biocontrol agents, as plant growth promoters and as inducers of plant resistance to diseases. In addition, they are important in the sustainability of natural ecosystems. Aiming to verify the population density of Trichoderma fungi in natural environments and agroecosystems, in Cerrado area, samples of soils and roots from native vegetation and agroecological production system were collected in the Federal District, Brazil. The collection points were randomly selected, and each soil or root sample was individually wrapped. The soil adhered to the roots was removed for evaluations. Serial sample dilutions and number of Colony Forming Units (CFUs) of Trichoderma isolates were performed. The results showed that the number of CFU varied depending on the plant and location evaluated. The replacement of native vegetation by organic farming systems did not result in a significant reduction in this number.

RESUMO O mofo branco tem sido responsável por danos expressivos à cultura do feijoeiro. Objetivou-se avaliar o efeito de regimes de luz na produção de conídios de Trichoderma harzianum e na efetividade destes em inibir a germinação miceliogênica de escleródios de Sclerotinia sclerotiorum, bem como de isolados de T. harzianum na supressão de lesões causadas por S. sclerotiorum sobre folíolos de feijoeiro. O isolado CEN287 inibiu a germinação miceliogênica de 80 % dos escleródios avaliados. Tal efetividade não se alterou quanto ao regime de luz empregado para a obtenção dos conídios de T. harzianum. Os isolados CEN287, CEN288 e CEN316 proporcionaram os menores valores médios de lesão foliar aos 10 dias após a inoculação, sendo de 4,25 mm2; 2,97 mm2; e 2,98 mm2, respectivamente. Em relação à testemunha, tais valores foram significativamente inferiores (72,90 mm2), o que impediu a rápida deterioração do tecido vegetal.

ABSTRACT White mold has been responsible for expressive damages to the common bean crop. This study aimed at evaluating the effect of light regimes used for producing Trichoderma harzianum conidia and the effectiveness of these to inhibit the myceliogenic germination of Sclerotinia sclerotiorum sclerotia, as well as the effect of T. harzianum isolates in the suppression of lesions caused by S. sclerotiorum on common bean leaflets. The CEN287 isolate inhibited the myceliogenic germination in 80 % of the sclerotia evaluated. Such effectiveness was indifferent, regarding the light system used to obtain the T. harzianum conidia. The CEN287, CEN288 and CEN316 isolates showed the lowest average values of leaf lesion at 10 days after inoculation, being respectively 4.25 mm2, 2.97 mm2 and 2.98 mm2. Concerning the control, these values were significantly lower (72.90 mm2), what prevented the early deterioration of plant tissue.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar isolados de Trichoderma harzianum para o controle biológico do mofo-branco em feijão (Phaseolus vulgaris). Cinco isolados foram avaliados para o biocontrole do mofo-branco em feijão 'Pérola', em condições de campo, nos anos agrícolas 2009 e 2010. Um isolado comercial (1306) e um tratamento testemunha foram incluídos. Aplicações foliares a 2x109 conídios mL-1 foram realizadas aos 42 e 52 dias após a semeadura (DAS), em 2009, e aos 52 DAS em 2010. Os isolados CEN287, CEN316 e 1306 reduziram o número de apotécios por metro quadrado de Sclerotinia sclerotiorum, em comparação à testemunha, nos dois anos agrícolas. CEN287, CEN316 e 1306 reduziram a severidade do mofo-branco no período experimental, quando comparados à testemunha.

Abstract: The objective of this work was to evaluate Trichoderma harzianum isolates for biological control of white mold in common bean (Phaseolus vulgaris). Five isolates were evaluated for biocontrol of white mold in 'Perola' common bean under field conditions, in the 2009 and 2010 crop seasons. A commercial isolate (1306) and a control treatment were included. Foliar applications at 2x109 conidia mL-1 were performed at 42 and 52 days after sowing (DAS), in 2009, and at 52 DAS in 2010. The CEN287, CEN316, and 1306 isolates decreased the number of Sclerotinia sclerotiorum apothecia per square meter in comparison to the control, in both crop seasons. CEN287, CEN316, and 1306 decreased white mold severity during the experimental period, when compared to the control.

O efeito antagônico exercido por fungos do gênero Trichoderma foi avaliado contra os fitopatógenos Sclerotium rolfsii e Verticillium dahliae, isolados de áster ornamental e morangueiro, respectivamente. Utilizaram-se 20 isolados do antagonista, pertencentes às espécies T. asperellum, T. hamatum, T. harzianum, T. koningiopsis, T. spirale e Trichoderma sp. O antagonismo foi verificado por meio de testes de culturas pareadas e produção de metabólitos bioativos pelo método de sobreposição de placas. A maioria dos isolados exibiu efeito inibitório sobre o crescimento micelial de S. rolfsii e V. dahliae quando comparado com as testemunhas. Excetuando-se os testes de produção de metabólitos não-voláteis, verificou-se maior ação inibitória contra V. dahliae. Mesmo os metabólitos não-voláteis termoestáveis apresentaram efeito inibitório contra ambos os patógenos testados, mostrando que os metabólitos secundários do antagonista exercem efeito significativo sobre essas espécies patogênicas.

The antagonistic effect shown by fungi of the genus Trichoderma was assessed against the plant pathogens Sclerotium rolfsii and Verticillium dahlia, isolated from ornamental aster and strawberry, respectively. Twenty isolates of the antagonist were employed; they belonged to the species T. asperellum, T. hamatum, T. harzianum, T. koningiopsis, T. spirale and Trichoderma sp. Antagonism was investigated by means of dual culture tests and bioactive metabolite production based on the overlapping plate method. Most selected isolates had an inhibitory effect on the mycelial growth of S. rolfsii and V. dahlia, compared to controls. Except for non-volatile metabolite production tests, inhibitory action against V. dahliae was highest. Even the thermostable non-volatile metabolites showed inhibitory effect against both tested pathogens, evidencing that the secondary metabolites of the antagonist have a significant effect on these pathogenic species.

O objetivo deste trabalho foi avaliar isolados de Trichoderma harzianum quanto ao biocontrole de patógenos veiculados por sementes de feijoeiro comum, à promoção do crescimento de plantas e à rizocompetência. Cinco isolados foram avaliados e comparados com um isolado comercial (Ecotrich), com Carboxin+Thiram, e com um controle negativo. Sementes de feijão da cultivar Jalo Precoce, contaminadas por Aspergillus, Cladosporium e Sclerotinia sclerotiorum, foram microbiolizadas com antagonistas e, em seguida, foram realizados testes de sanidade de sementes. Os isolados foram avaliados em substrato autoclavado e em condições de campo. Aos 10 dias após o semeio (DAS), mediu-se o comprimento das plantas. Para os testes de rizocompetência, os isolados foram pulverizados sobre caixas contendo areia lavada autoclavada, e a colonização das raízes foi avaliada aos 10 DAS, tendo-se utilizado cinco plantas por caixa. Os isolados mais efetivos nos testes de sanidade de sementes foram: CEN287 e CEN289 para controle de Aspergillus; o isolado comercial para Cladosporium; e CEN287 e CEN316 para S. sclerotiorum. Os isolados CEN289 e CEN290 promoveram o crescimento do feijoeiro em casa de vegetação e em campo. O tratamento de sementes com T. harzianum reduz a incidência de Aspergillus, Cladosporium e S. sclerotiorum em sementes do feijoeiro comum 'Jalo Precoce'.

The objective of this work was to evaluate isolates of Trichoderma harzianum regarding biocontrol of common bean seed-borne pathogens, plant growth promotion, and rhizosphere competence. Five isolates of T. harzianum were evaluated and compared with commercial isolate (Ecotrich), Carboxin+Thiram, and an absolute control. Bean seeds of the cultivar Jalo Precoce, contaminated with Aspergillus, Cladosporium, and Sclerotinia sclerotiorum, were microbiolized with antagonists, and seed health tests were carried out. Isolates were evaluated on autoclaved substrate and in field conditions. Ten days after sowing (DAS), plant length was measured. To test rhizosphere competence, isolates were applied in boxes containing autoclaved washed sand, and root colonization was evaluated at 10 DAS, using five plants per box. The most effective isolates in the seed health tests were: CEN287 and CEN289 to control Aspergillus; the commercial isolate to control Cladosporium; and CEN287 and CEN316 to control S. sclerotiorum. Isolates CEN289 and CEN290 promoted bean growth in greenhouse and field. Seed treatment with T. harzianum reduces the incidence of Aspergillus, Cladosporium, and S. sclerotiorum in 'Jalo Precoce' common bean seeds.

Este trabalho teve como objetivo estabelecer condições ideais para a produção massal de conídios do fungo Dicyma pulvinata. Quatro isolados do fungo foram comparados em termos de seu crescimento e produção de conídios em diferentes substratos (grãos de arroz parboilizado, arroz comum, milho e trigo, além de flocos de milho e casca de arroz), temperaturas (19, 22, 25, 28 e 31ºC), recipientes de cultivo (bandejas de alumínio, sacos de polipropileno e Erlenmeyers) e regimes de luz (escuridão contínua, fotoperíodos de 6 e de 12 horas de luz/escuro, e luz contínua). Os efeitos da temperatura sobre a capacidade germinativa dos conídios também foram avaliados. Os experimentos foram conduzidos em delineamento de blocos ao acaso, em arranjos fatoriais (isolados x tratamentos - substratos, recipientes, temperaturas e regimes de luz), com quatro repetições. De modo geral, sacos de polipropileno e arroz parboilizado proporcionaram o melhor desenvolvimento do fungo. Fotoperíodos de 0 e 6 horas de luz favoreceram o crescimento micelial, enquanto que a luz contínua favoreceu a esporulação dos isolados. Todas as temperaturas testadas propiciaram o cultivo do fungo, exceto a de 31ºC. Temperaturas entre 19 e 25ºC asseguram germinação superior a 76% dos conídios do fungo.

The objective of this work was to set up ideal conditions for conidia mass production of Dicyma pulvinata. Four isolates were compared in terms of their growth and conidia production on various substrates (grains of parboiled rice, common rice, maize and wheat, besides chipped maize and rice husk), temperatures (19, 22, 25, 28 and 31ºC), growth containers (aluminum trays, polypropylene bags and Erlenmeyers) and light regimes (continuous darkness, 6 and 12 hours of light/darkness, and continuous light). Temperature effects on conidia germination capacity were also evaluated. The experiments were done in randomized complete block designs, in factorial arrangements (isolates x treatments - substrates, containers, temperatures and light regimes), with four replicates. In general, parboiled rice and polypropylene bags provided the best development of the fungus. Complete darkness and 6 hours of light increased mycelial growth, whereas continuous light favored sporulation. All tested temperatures favored the cultures of the fungus, except 31ºC. Temperatures between 19 and 25ºC ensure spore germination of more than 76%.

O presente trabalho foi desenvolvido em casa de vegetação, na Estação Biológica da Universidade de Brasília, com objetivo de avaliar genótipos de maracujazeiro-amarelo frente ao fungo C. gloeosporioides, agente causal da antracnose. Para inoculação dos genótipos, utilizou-se uma suspensão contendo 5x10(6) esporos/mL do patógeno, depositados sobre ferimentos preestabelecidos com auxílio de escova de aço de cerdas finas. A primeira avaliação foi realizada 20 dias após a inoculação, e as demais, a intervalos de 7 dias, encerrando-se na sétima avaliação, aos 62 dias. Determinaram-se a incidência e a severidade da antracnose, com auxílio de uma escala graduada de notas, onde 1 = ausência de sintomas e 7 = desfolha. Consideraram-se as plantas como: Resistentes (R), com notas médias < 2; Moderadamente Resistentes (MR), com notas médias > 2 e < 3; Suscetíveis (S), com notas médias > 3 e < 4; e Altamente Suscetíveis (AS), com notas médias > 4. No geral, dois genótipos foram classificadas como Moderadamente Resistentes; oito, como Suscetíveis e 62, como Altamente Suscetíveis.

The present work was carried out in order to evaluate the resistance of passion fruit genotypes to C. gloeosporioides, the agent of anthracnose. C. gloeosporioides was inoculated in the lineages of passion fruit plants at a concentration of 5x10(6) spores on wounds pre-established by abrasion with a fine steel brush. The first evaluation was carried out 20 days after the inoculation and the others in intervals of seven days, ending in the seventh evaluation 62 days after the inoculation. To evaluate the degree of incidence and severity of anthracnose, a grade scale was established, where 1 = absence of symptoms and 7 = leaf loss. Average grades < 2 = Resistant (R); > 2 and < 3 = Moderately Resistant (MR); > 3 and < 4 = Susceptible (S) and > = Highly Susceptible (HS). In general, two genotypes were classified as Moderately Resistant; eight as Susceptible and sixty-two were highly Susceptible.

O objetivo deste trabalho foi avaliar quatro isolados do fungo antagonista Dicyma pulvinata quanto à compatibilidade com defensivos agrícolas e adjuvantes, e a eficiência desses isolados no controle do mal-das-folhas (Microcyclus ulei) da seringueira (Hevea sp.) em campo. A compatibilidade dos isolados com defensivos e adjuvantes foi avaliada com base no crescimento micelial e na esporulação do fungo, em testes conduzidos in vitro. Para avaliação da eficiência do antagonista contra M. ulei, em campo, os quatros isolados do antagonista foram comparados ao controle exercido pelo tratamento com os fungicidas propiconazol + mancozeb. Os ensaios conduzidos em laboratório indicaram a incompatibilidade de D. pulvinata com os fungicidas benomyl, carbendazim, mancozeb, propiconazol e, ainda, com o inseticida acaricida endosulfan. Dois dos adjuvantes testados (Tween 20 e Tween 80) não afetaram o desenvolvimento do fungo. Foi comprovada a ação do antagonista D. pulvinata sobre M. ulei, em campo, com destaque para os isolados CEN 62 e CEN 93, que apresentaram eficiência de controle semelhante ao tratamento fungicida padrão.

The objective of this work was to evaluate four isolates of the antagonist fungus Dicyma pulvinata in terms of its compatibility with chemical pesticides and adjuvants products, and the efficiency of these isolates as biocontrol agent against South American leaf blight (Microcyclus ulei) of rubber tree (Hevea sp.) under field conditions. Isolates compatibility with chemical pesticides and adjuvants was evaluated on mycelial growth and fungus sporulation in vitro. To assess the efficiency of the antagonist against M. ulei under field conditions, the four isolates were compared to the control by the fungicide mixture propiconazol + mancozeb. The assays showed incompatibility of the antagonistic fungus with the fungicides benomyl, carbendazim, mancozeb, propiconazol, besides the insecticide-acaricide endosulfan. Two of the adjuvants tested did not affect the fungus development. It was demonstrated the action of D. pulvinata against M. ulei, in the field, especially for the isolates CEN 62 and CEN 93, which showed control levels similar to the fungicide standard treatment.

Dicyma pulvinata é um eficiente agente de biocontrole de Microcyclus ulei, causador do mal-das-folhas da seringueira. O objetivo deste trabalho foi obter isolados com grande potencial antagônico. Em levantamentos realizados em 14 municípios produtores de borracha, localizados nos Estados do Acre, Amazonas, Bahia, Mato Grosso, Pará e Rondônia, obtiveram-se 52 isolados de D. pulvinata. O fungo antagônico, isolado diretamente em meio de cultura de batata-dextrose-ágar (BDA), foi identificado com base na morfologia dos conídios e conidióforos e preservado pelos métodos da liofilização, congelamento à temperatura de -80ºC e criopreservação em nitrogênio líquido, a fim de manter as características morfológicas e patogênicas dos isolados. O efeito antagônico foi testado por meio de inoculações de D. pulvinata em lesões de Fusicladium macrosporum induzidas em plantas de seringueira previamente infectadas. Todos os isolados foram incorporados à coleção de fungos da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.

Dicyma pulvinata is an efficient biocontrol agent of Microcyclus ulei, causal agent of South American leaf blight. The objective of this work was to obtain strongly antagonistic isolates. A survey was carried out in rubber plantations located in 14 municipalities in the Sates of Acre, Amazonas, Bahia, Mato Grosso, Pará and Roraima, Brazil, obtaining 52 isolates of D. pulvinata. The antagonistic fungus was isolated on potato-dextrose-agar (PDA) plates and identified based on morphological characteristics of conidiophores and conidia, and colony appearance. The antagonic effect was tested by inoculating D. pulvinata on Fusicladium macrosporum lesions induced on rubber plants, previously. In order to maintain the morphological and pathogenic traits, fungus isolates were preserved by lyophilization, deep freeze (-80ºC) and cryogeny. All isolates were introduced into Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia fungus collection.

A variabilidade genética entre 22 isolados dos fungos Alternaria alternata e A. Cassiae, obtidos de Senna obtusifolia, foi estudada através da análise de RAPD. No total, 491 bandas foram selecionadas com o uso de 28 primers. O agrupamento baseado em similaridades computadas dos marcadores mostrou dois distintos grupos de isolados relacionados às espécies. A análise de RAPD provou ser um método eficiente para detecção da variabilidade genética entre isolados de A. alternata e A. cassiae ocorrendo em S. obtusifolia, e também para distinguir as espécies de Alternaria.

The genetic variability of 22 isolates of the fungi Alternaria alternata and A. cassiae, obtained from Senna obtusifolia, was studied by RAPD analysis. A total of 491 scorable bands were produced with the use of 28 primers. Cluster analysis based on similarities computed from RAPD markers showed two distinct genetic groups of isolates related to both species. RAPD analysis proved to be an efficient method for detecting genetic variability of A. cassiae and A. alternata isolates occurring in S. obtusifolia, and also for distinguishing Alternaria species.

Visando ajustar metodologia de produção de inóculo, um isolado do fungo Alternaria cassiae, selecionado como agente para biocontrole de fedegoso (Senna obtusifolia), foi estudado quanto ao crescimento micelial e esporulação em diferentes meios de cultura e condições de cultivo. Meio V-8 caseiro sem adição de CaCO3, incubação em volume de 200-250 mL de meio (cerca de 50% do volume do frasco), período de 48 horas de agitação a 250 rpm, seguida de exposição da massa micelial em escuro contínuo foram as condições que se mostraram mais adequadas para a produção de inóculo em larga escala. A esporulação foi favorecida por incubação da massa micelial a 25ºC. A adoção de 300 mL de massa fúngica por bandeja (29,9 x 44,5 x 5,0 cm) possibilitou secagem rápida, assegurando a integridade dos conídios, refletida na maior infectividade do inóculo produzido.

In order to adjust the methodology of inoculum production, an isolate of the fungus Alternaria cassiae, selected as a biological control agent for sicklepod (Senna obtusifolia) was studied under different culture media and mycelial growth conditions. Homemade V-8 juice medium without CaCO3 addition, incubation on 200-250 mL of medium (around 50% of the flask volume) with agitation at 250 rpm during 48 hours, followed by mycelial mass growth in continuous dark were appropriate conditions for a large scale production of inoculum. The sporulation was aided by incubation of the mycelial mass at 25ºC. The use of 300 mL of mycelial mass per pan (29.9 by 44.5 by 5.0 cm ) to induce the sporulation provided rapid dryness and ensured the conidium integrity, indicated by higher infectivity of the inoculum.